CM Słabe jony-Chromatografia z membraną wymienną

SP Silna chromatografia membranowa kationowymienna Wprowadzenie produktu 

 

2. Zalety produktu

Szybko i wydajnie. Wysoką zdolność wiązania można osiągnąć przy natężeniu przepływu do 40 razy większym niż w przypadku tradycyjnej chromatografii na żywicy. W porównaniu z konwencjonalną chromatografią-na bazie żywicy, czas procesu przy użyciu chromatografii membranowej można skrócić 30–40 razy. Typowe robocze natężenie przepływu wynosi około 10 MV/min.

2.2 Wysoka skuteczność wiązania Chromatografia membranowa wykazuje wysoką zdolność wiązania i duże szybkości przepływu przy niskim spadku ciśnienia, umożliwiając wychwycenie naładowanych biomolekuł podczas jednego przejścia przez moduł.

2.3 Skalowalność i elastyczność Pełna gama produktów do chromatografii membranowej może zaspokoić różnorodne potrzeby oczyszczania biomolekuł, obejmując zastosowania od opracowania procesu po produkcję-na dużą skalę. Konstrukcja kapsułki pozwala na jednorazowe-użycie lub może zostać wyczyszczona i ponownie użyta po odpowiednich procedurach czyszczenia.

2.4 Zwiększona produktywność Kompaktowa konstrukcja minimalizuje powierzchnię zajmowaną przez obiekt. Eliminując operacje takie jak pakowanie kolumny, czyszczenie, walidacja czyszczenia i przechowywanie kolumny, przetwarzanie można rozpocząć po prostym zrównoważeniu ze stosunkowo mniejszą ilością buforu. Ponieważ nie ma potrzeby pakowania, czyszczenia ani przechowywania kolumny, koszty pracy można obniżyć o ponad 50%.

 

 

3 Parametry techniczne

3.1 Materiały konstrukcyjne

	Skala laboratoryjna	mała skala	skala pilotażowa	skala produkcji
objętość membrany	0,2 ml	5ml	140ml	5L
Struktura wspierająca membranę	Polipropylen
obudowa membrany	Polipropylen
O-pierścień	Silikon

3.2 Charakterystyka robocza

	Skala laboratoryjna	mała skala	skala pilotażowa	skala produkcji
objętość membrany	0,2 ml	5ml	400ml	5L
Zalecane natężenie przepływu	1-6ml/min	25-150ml/min	2-12 l/min	25-150 l/min
Maksymalna temperatura robocza	35 stopni
Maksymalne ciśnienie robocze	3 bary (25 stopni)
Maksymalna różnica ciśnień	3 bary (25 stopni)
Warunki przechowywania	20% etanoladziwnesrozwiązanie

Porównanie pokazuje, że żywotność chromatografii membranowej SP jest porównywalna z żywotnością SP Sepharose 6FF.

Rycina 1. Zmiany zdolności wiązania chromatografii membranowej SP po wielokrotnych zastosowaniach testowanych z lizozymem

Ponadto oceniliśmy chromatografię membranową pod kątem jej skuteczności w usuwaniu białek i kwasów nukleinowych komórek gospodarza. Wyniki są następujące:

	DNA				pracownik służby zdrowia
	Odzyskiwanie IgG	Zawartość (pg/mg IgG) metodą RT PCR		Czynnik usuwania	Zawartość (ng/mg IgG) według Elisy		Czynnik usuwania
Uruchomić	%	Przed membraną Q	Po membranie Q	Dziennik	Przed membraną Q	Po membranie Q	Dziennik
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Tabela 1. Szybkość usuwania DNA i białek komórek gospodarza w materiale IgG wykazującym ekspresję-CHO przy użyciu chromatografii membranowej SP

Seria eksperymentów wykazała, że ​​chromatografia membranowa SP może skutecznie usuwać zanieczyszczenia przy jednoczesnym utrzymaniu wysokiego stopnia odzysku docelowej IgG.

Porównując chromatografię membranową Gudiling SP z importowanymi markami, dane dotyczące zdolności wiązania są następujące:

Wiążącycpojemność (mg/ml)	Sartoriusa	CAŁUN	Prowadzenie
Lizozym	25	32	29
Trypsyna	22	27	25

Tabela 2. Wydajność wiązania różnych białek naszych produktów i marek konkurencyjnych

Ogólna ocena pokazuje, że nasza zdolność wiążąca jest porównywalna z zdolnością produktów importowanych.

Rycina 2. Test zdolności wiązania modułu chromatografii membranowej SP z użyciem lizozymu jako standardu

W porównaniu z dynamiczną zdolnością wiązania i produktami importowanymi potwierdzono, że większość białek docelowych można wychwycić, gdy lizozym eluuje się 190 mM NaCl.

Dzięki różnym warunkom elucji odkryliśmy, że profile elucji chromatografii membranowej są podobne do profili elucji na żelu agarozowym, ale czystość białek różni się znacznie przy różnych stężeniach soli. W rzeczywistych pracach badawczo-rozwojowych i produkcyjnych konieczne jest ilościowe określenie optymalnych warunków elucji, aby uzyskać białka docelowe o wysokiej-czystości.

 

4 Typowe przypadki zastosowań

Usuwanie DNA, wirusów i białek komórek gospodarza

Wychwytywanie plazmidów, wirusów, białek i oczyszczanie oligonukleotydów

Usuwanie pigmentów z drożdżowego bulionu fermentacyjnego i-wychwytywanie białek o dużej wydajności

 

5 Procedura użytkowania

5.1 Przygotowanie i montaż sprzętu:

5.1.1:Zainstaluj moduł chromatografii membranowej w systemie chromatograficznym ĘKTA, postępując zgodnie z procedurami podobnymi do kolumn z żywicą, upewniając się, że kierunek przepływu jest zgodny ze strzałkami modułu i orientacją wlotu. Podłącz moduł za pomocą zamków typu Luer lub złączek-, aby zapewnić bezpieczną integrację z systemem.

5.1.2 Ustawić natężenie przepływu zasilania na5–10 MV/mini odgazuj moduł przy użyciu buforu równoważącego, upewniając się, że wyciek jest wolny od pęcherzyków powietrza. Po odgazowaniu podłączyć wylot permeatu do układu chromatograficznego.

5.2:Obróbka-przed użyciem:

5.2.1:

Ustaw natężenie przepływu zasilania na5–10 MV/mini wykonaj-obróbkę wstępną0,5 M NaOH przez ponad 5 MVzapewniając, że membrana osiągnie pełną równowagę.

5.2.2: Przy tym samym natężeniu przepływu wykonaj-obróbkę wstępną za pomocą1 M NaCl dla ponad 5 MVaby zapewnić osiągnięcie przez membranę pełnej równowagi.

5.3 Proces chromatograficzny

5.3.1 Ustawić natężenie przepływu zasilania na 5–10 MV/min i zrównoważyć membranę buforem równoważącym pod napięciem większym niż 5 MV, aż membrana osiągnie pełną równowagę.

5.3.2 Po-filtracji wstępnej 0,22 μm, nałóż próbkę na membranę, aż do zakończenia ładowania próbki lub osiągnięcia chromatograficznej zdolności wiązania.

5.3.3 Przemyć buforem równoważącym przez ponad 10 MV, aż sygnał UV powróci do linii podstawowej.

5.3.4 Zastosuj elucję gradientową lub stopniową zgodnie z projektem procesu i zbierz frakcje zgodnie z wymaganiami.

5.4 CIP po-obróbce po użyciu – urządzenie do chromatografii membranowej CIP (czyszczenie na miejscu)

5.4.1 Ustawić natężenie przepływu zasilania na 5–10 MV/min i przeprowadzić czyszczenie 1 M NaOH przez ponad 10 MV, aż sygnał UV spadnie poniżej linii bazowej.

5.4.2 Po 30 minutach cyrkulacji przełączyć na mycie wodą, aż pH osiągnie 7–8, następnie kontynuować czyszczenie 20% etanolem, aż przewodność stanie się prawie stała.

5.5 Przechowywanie chromatografii membranowej

Po użyciu i zakończeniu procesu CIP moduł membranowy można wyjąć i przechowywać poprzez namoczenie w 20% etanolu lub można go przechowywać-w linii w temperaturze pokojowej w roztworze zawierającym 20% etanolu. Należy okresowo sprawdzać i wymieniać 20% roztwór etanolu.

 

6. Informacje dotyczące zamówienia

Q Silny filtr kapsułkowy do chromatografii z membraną anionowymienną

	Skala laboratoryjna	mała skala	skala pilotażowa	skala produkcji
Model produktu	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Objętość membrany	0,2 ml	5ml	400ml	5L

Popularne Tagi: cm słabych jonów-chromatografia membranowa do wymiany, Chiny, dostawcy, producenci, fabryki, hurtownia, luzem, w magazynie, bezpłatna próbka