Odpowiedzi na profesjonalne pytania dotyczące ultrafiltracyjnej rury odśrodkowej

1. Jaki jest materiał membrany rury ultrafiltracyjnej?

Membrana z polieterosulfonu charakteryzuje się wyraźnym i dokładnym przechwytywaniem masy cząsteczkowej, stabilnymi właściwościami fizycznymi i chemicznymi, wyjątkowo niską adsorpcją białek i wysokim odzyskiem produktu

2. Jeśli trzeba oddzielić białka o różnych masach cząsteczkowych, jaka jest różnica w masie cząsteczkowej białek?

Te dwa białka muszą być 10 razy lub więcej różnej wielkości

3. Czy do zatężania wirusa można użyć probówki wirówki ultrafiltracyjnej?

Probówka do wirowania ultrafiltracyjnego może wielokrotnie lub nawet wielokrotnie zagęszczać wirusa. Mamy specjalną membranę dla wirusa. Różne wirusy muszą wybrać odpowiedni rozmiar porów membrany

4. Czy probówka wirówki ultrafiltracyjnej może być dezynfekowana i odporna na alkalia?

Można go dezynfekować 75-procentowym roztworem wodnym etanolu. Nasz materiał może wytrzymać mycie alkaliczne 0.1-0,5n wodorotlenkiem sodu

5. Czy rurkę wirówki ultrafiltracyjnej można stosować do sterylizacji wysokociśnieniowej -?

Posiadamy specjalną probówkę wirówkową do ultrafiltracji, odpowiednią do sterylizacji pod wysokim -ciśnieniem

6. Biorąc pod uwagę stabilność białek, czy probówkę ultrafiltracyjną można wirować w niskiej temperaturze?

Tak, nasz materiał jest odporny na niskie temperatury, ale czas koncentracji będzie dłuższy. Szybkość filtracji membrany zależy od temperatury cieczy zasilającej

7. O stopie zwrotu

Ogólnie rzecz biorąc, stopień odzysku substancji rozpuszczonych o stężeniu większym niż 0,1 mg/ml wynosi 90 procent lub więcej. Generalnie strata próbek jest spowodowana niespecyficzną adsorpcją na powierzchni membrany filtracyjnej i powierzchni rury materiałowej. Aby uzyskać wysoki stopień odzysku, zatrzymana masa cząsteczkowa wybranej membrany filtracyjnej wynosi około 1/3 białka docelowego, membrana ultrafiltracyjna jest membraną asymetryczną, jej rozmiar porów jest normalnie rozłożony i może przeciekać pod wpływem wirowania nacisk. W tych warunkach płyn białkowy może ulec deformacji, dlatego im mniejszy jest otwór przechwytujący, tym wolniejsze jest natężenie przepływu, ale szybkość odzysku będzie wyższa

8. Gdy białko jest skoncentrowane, następuje wytrącanie. Jak sobie z tym poradzić?

Jeśli białko jest skoncentrowane zbyt szybko lub zbyt mocno, może powodować wytrącanie białka. Stężenie końcowe po stężeniu białka nie powinno być zbyt wysokie; W przypadku białek wrażliwych na szybkość koncentracji i łatwych do wytrącenia sugerowane metody poprawy są następujące:

1) Zmniejsz prędkość odśrodkową,

2) Użyj membrany ultrafiltracyjnej o większej masie cząsteczkowej

3) Dmuchnij i ssaj rurkę do koncentracji, a następnie odwiruj

9. Jakie są możliwe powody, dla których probówki wirówki ultrafiltracyjnej nie można odwirować?

Jeśli probówki ultrafiltracyjnej nie można odwirować, wstępne wirowanie można przeprowadzić z około 20 procentowym roztworem wodnym etanolu, ponieważ po całkowitym wysuszeniu membrany ultrafiltracyjnej powierzchnia membrany jest słabo hydrofobowa, a strumień można przywrócić po nasączeniu o małej powierzchni rozpuszczalnik naprężający

10. Właściwe użytkowanie i konserwacja rury ultrafiltracyjnej

Probówkę ultrafiltracyjną przed użyciem należy wstępnie odwirować w oczyszczonej wodzie w celu sprawdzenia jej integralności. Po każdym użyciu należy przechowywać ją w stanie mokrym, aby zapobiec wysychaniu membrany

11. Jak usunąć endotoksynę z rurki ultrafiltracyjnej?

Dostarczona przez nas rurka ultrafiltracyjna nie była leczona endotoksyną. Jednocześnie, ze względu na powszechne występowanie endotoksyn w przyrodzie, próbki wymagające toksyn wewnętrznych można przed eksperymentem wstępnie oczyścić 0.5N wodorotlenkiem sodu, a następnie oczyścić wodą RO w celu usunięcia większości endotoksyn

12. Gdy zatężone białko jest analizowane w dalszej kolejności, okazuje się, że występuje interferencja. Jaki jest powód?

Rurę ultrafiltracyjną można wstępnie wyczyścić buforem lub wodą oczyszczoną. Jeśli zakłócenia nadal występują, wyczyść je za pomocą 0.1N wodorotlenku sodu, a następnie wyczyść oczyszczoną wodą

13. W procesie zatężania może wystąpić niespecyficzna adsorpcja między białkiem docelowym a membraną ultrafiltracyjną. Jak to poprawić?

Stosujemy hydrofilową membranę polieterosulfonową, ale w przypadku niektórych białek o specjalnych właściwościach ich niespecyficzna adsorpcja na membranie może być zwiększona. W takim przypadku możemy spróbować przygotować rurkę ultrafiltracyjną przed eksperymentem lub skontaktować się z naszym inżynierem

14. Po zatężeniu okazuje się, że w koncentracie nie ma białka docelowego. Jakie są możliwe przyczyny?

1) Początkowe stężenie białka nie powinno być zbyt niskie. Jeśli stężenie jest zbyt niskie, membrana może nie zostać zachowana

2) Wybierz odpowiedni rozmiar porów membrany. Wirowanie i zagęszczanie probówki ultrafiltracyjnej należy do filtracji ślepej. Rozmiar porów membrany jest zwykle mniejszy niż 2 lub więcej razy w stosunku do białka docelowego

3) Wybierz odpowiednią prędkość wirowania

4) Czy docelowe białko wytrąca się?