Często zadawane pytania dotyczące filtrowania usuwania wirusów
Często zadawane pytania dotyczące filtrowania usuwania wirusów
Q1. Jaki jest mechanizm usuwania wirusów w filt usuwania wirusówracjonować?
O: Mechanizm usuwania wirusów w filtracji do usuwania wirusów opiera się na (1) wykluczeniu rozmiaru cząstek--wirus jest większy niż rozmiar porów membrany filtra, a produkt przechodzi przez membranę filtra, podczas gdy wirus jest zatrzymywany . (2) Mechanizm adsorpcji — W przypadku wirusów, których rozmiar jest mniejszy niż pory błony, wirusy są wychwytywane przez siły ładunku, wiązania van der Waalsa i wiązania wodorowe i tak dalej.
Q2.Zasadą filtracji usuwającej wirusy jest nanofiltracja. Jakie są wymagania dotyczące ilości początkowego wirusa dodawanego podczas weryfikacji nanofiltracji?
Odp.: Normą branżową jest próba uzyskania wartości niższej niż 8log.
Q3.Czy filt do usuwania wirusówracjonowaćselektywny dla typów wirusów? Na przykład: z membraną lub bez, DNA lub RNA
O: Wybór membran do usuwania wirusów musi koncentrować się na solidności usuwania wirusów, filtrowalności i wydajności amplifikacji; mechanizm membran usuwających wirusy opiera się na wykluczaniu wielkości i nie wybiera rodzaju genomu wirusa.
Q4. Korzystanie m.inbłonaDousunąć wirusy, integralność membrany jest bardzo ważna. TStandard integralności usuwania wirusów powinien odnosić się do producenta's standard lub trzeba ustawić standard zgodnie z rzeczywistą sytuacją?
Odp .: Producenci przeprowadzają testy fabryczne, a także muszą być testowane podczas produkcji, w oparciu o wyniki testów wstępnych. Wirusy bezotoczkowe wykorzystują metodę infekcji. Wirusy otoczkowe opierają się na zasadzie, że metoda próby infekcji będzie kolidować z metodą wykrywania.
Q5.Po zwiększeniu skali procesu (np. z 500 l do 2000 l) zrób toTotrzeba ponownie zweryfikować usunięcie wirusa?
Odp.: Wzmocnienie procesu i zmiany procesu muszą być oceniane w połączeniu ze zmianami procesu przed i po nim. Generalnie wymagana jest rewalidacja.
Q6. Korzystanie m.inmembrana do usuwania wirusa, jeśli torebka z membraną jest ponownie używana, jak postępować z uwięzionym w niej wirusem?
Odp.: Membrany filtrów do usuwania wirusów są na ogół jednorazowymi materiałami eksploatacyjnymi i nie będą ponownie używane.
Q7. Cotrzeba zwrócić uwagęprzy wyborzeindicator virus do inaktywacji wirusa przez pH?
O: Krótko mówiąc, zalecane są wirusy otoczkowe.
Q8.Jakie są wymagania dotyczące usuwania wirusów na różnych etapach badań i rozwoju?
Odp.: W celu dopuszczenia do obrotu wymagana jest kompleksowa weryfikacja oparta na ICH Q5A, a uproszczona weryfikacja w porównaniu z ICH Q5A może być stosowana w przypadku produktów badań klinicznych fazy I, II i III.
Q9.Po co zakładać filtr wstępny?
Odp.: Dla różnych próbek, gdy nie ma filtra wstępnego, średnie obciążenie masowe filtra do usuwania wirusów wynosi 5 kg/m², a po zastosowaniu filtra wstępnego średnie obciążenie masowe wynosi około 13 kg/m2. Możemy stwierdzić, że dodając filtr wstępny, wydajność filtracji niektórych próbek można zwiększyć około 6-krotnie.
Q10. Czy usuwanie wirusa należy przeprowadzić w pierwszej fazie klinicznej, czy w innych etapach?
Odp.: Weryfikacja usunięcia wirusa musi zostać przeprowadzona przed badaniem klinicznym.
Q11.Czy wydajność usuwania wirusów jest podana w litrach objętościowych, czy białko całkowite w kilogramach?
Odp.: Filtracja do usuwania wirusów oferuje dwie możliwości, pojemność objętościową i pojemność masową.
Q12.Czy weryfikacja usunięcia wirusa odbywa się na etapie CMC?
Należy to zrobić przed użyciem w ludzkim ciele.
Q13.Jaka jest szybkość odzyskiwania białka?
O: 98 procent i więcej.
Q14.Jakie czynniki wpływają na efekt usuwania wirusów przez filtr usuwania wirusówracjonować?
Odp.: Filtracja usuwająca wirusy może w znacznym stopniu usuwać wirusy, a jej efekt usuwania jest związany z takimi czynnikami, jak miejsce, w którym odbywa się filtracja usuwająca wirusy, stężenie roztworu, czystość roztworu, ciśnienie filtracji i obciążenie itd.
Q15.Jaka jest różnica w wydajności retencji wirusów?
Odp.: Dzięki eksperymentom uzyskaliśmy brak różnicy we wskaźniku retencji wirusa w zakresie stężenia białka w paszy wynoszącym 2-24g/L i nie ma różnicy w stopniu zatkania filtra na poziomie 89%.
